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不同的反应时间用酶免检测HCV抗体导致的漏检分析

浏览次数: 日期:2010年5月10日 14:56
下面这篇文章引自《中国输血杂志》2008年7月第21卷第7期,有效的说明了即便是用酶免试剂检测HCV抗体时,也会存在漏检的问题。所以国家现在提倡抗HCV试剂盒由间接法改为夹心法。
 
同种试剂不同孵育时间检测抗-HCV的差异分析
高丽 孙莉 任芙蓉 夏红英 李燕(北京市红十字血液中心,北京100088)
关键词:抗-HCV检测;长孵育法;短孵育法
中图分类号:R457.1 R446   文献标识码:B   文章编号:1004-549X(2008)07-531-02
 
    我国丙型肝炎发病患者数呈逐年上升趋势,严格筛选献血者,是切断其传染途径主要方法之一。根据《血站实验室质量管理规范》的要求,本中心多次参加卫生部指定的实验室质量考评。我们现就同一批考评样本用Ortho试剂长、短孵育法对抗-HCV检测结果做了比较分析,现报告如下。
1 材料与方法
11 样本来源  24份质控样本[卫生部临床检验中心,编号(NCCL)701-724]。2007年经本中心进行抗-HCV筛查,使用CHIRON RIBA HCV 3.0 SIA抗体试剂(美国强生公司)确证的180份样本(116份为阴性,64份阳性)。
12 试剂 丙型肝炎诊断试剂盒(Ortho公司:批号EXE149;Sorin公司:批号901154DA);NCCL 2NCU/ml抗-HCV质控血清。所有试剂均经中国药品生物制品检定所批批检验合格。
13 仪器 FAME全自动酶免检测系统;可调微量加样器;Mierowell System酶标仪;BIO ILAD1575洗板机;ABBOTr快速温箱。
14 方法 按照Ortho试剂盒说明书要求,采取了长短不同的孵育操作,长孵育法:2次(37±2)℃孵育,(60±5)min;短孵育法:2次,(37±2)℃ 孵育,(30±2)min。
15 统计学方法 采用SPSS 10.0软件,对2种不同孵育方法定性检测结果不一致的样本的S/C0值进行配对t检验,以P<0.05为具有统计学意义。
2 结果
21 24份质控样本检测 用Ortho试剂长孵育法检出9份阳性,短孵育法检出7份阳性;Sorin试剂共检出9份阳性。经卫生部临检中心确认,此9份样本为阳性结果(其中有差异的2份样本的结果见表1)。

1  不一致的2份样本检测结果 
 
Ortho(短孵育法)
Ortho(长孵育法)
Sorin
标本1
标本2
标本1
标本2
标本1
标本2
OD值
0.133
0.177
0.579
0.599
0.376
0.528
S/CO
0.432
0.575
1.160
1.200
1.480
2.079
注:t=13.136,P<0.05
22 180份已确证的样本检测 为了进一步确认长孵育的方法能够提高弱阳性样本的检出,我们将经过重组免疫印迹试验(RIBA)确证的180份样本,采取了长、短不同的孵育法检测(表2,3)
 
2   不同孵育法检测180份确证样本

 

                                                            n                                阳性数                           阴性数                           漏检数

                    Ortho 长孵育法          180                                    64                                 116                                  0
                    Ortho 短孵育法          180                                    57                                 123                                  7
                    Chiron 试剂*               180                                   64                                  116

   *为确证试剂 
 
 3   7份短孵育法漏检样本的长孵育法检测结果
`编号
长孵育法
短孵育法
OD
S/CO
OD
S/CO
0.644
1.073
0.283
0.852
0.821
1.368
0.330
0.994
0.696
1.160
0.297
0.895
0.797
1.328
0.264
0.795
0.617
1.028
0.312
0.940
0.724
1.207
0.281
0.846
0.665
1.108
0.311
0.937
 
3 讨论
    1998年颁布实施《中华人民共和国献血法》,严格筛选献血者,为切断主要的传染途径作出很大贡献。丙肝最常见的传播途径是输血、输血浆或血制品以及使用被病毒污染的医疗器械。虽然目前我国采供血机构已采用2种不同的酶联免疫试剂对血液做抗-HCV筛查,但阳性漏检和假阳性问题仍无法避免【1】 。近年来,关于输血原因感染丙肝的案例屡有发生,抗-HCV检测的准确性对所供血液的质量影响巨大,直接关系到临床用血安全等一系列问题。
    从本组实验数据可以看出,采用Ortho(长孵育法)、Sorin试剂对样本检测都具有较高的灵敏度,能有效的检测出抗-HCV强阳性和弱阳性的样本,符合卫生部临检中心的质量控制要求筛查实验的试剂要求敏感性高于特异性,不能漏诊;确证试剂要求特异性高于敏感性,不能误诊。我们是初筛实验室,灵敏度高的试剂是首选【2】。本实验说明,同一种Ortho试剂使用长短不同的孵育方法对弱阳性标本的检出能力有所不同。Ortho试剂短孵育法,对于抗-HCV较强的样本影响不大,但对于抗-HCV很弱的标本,可影响其抗原、抗体的结合程度,降低样本检测OD值,造成漏检。长孵育方法,由于孵育时间充分,灵敏度高,可大大降低弱阳性样本漏检的危险性,提高输血的安全性。为了保证临床所用血液的更大限度的安全,现本中心检验科已将使用Ortho试剂检测HCV抗体的检测项目,从短孵育操作方法改为长孵育操作方法。
参考文献
[1] 高峰,张晰,王迅,等.病毒标志物两次检测模式的探讨[J].中国输血杂志,2001,14(4):205—208
[2] 中国疾病预防控制中心.全国艾滋病检测技术规范(2004年版)[S].2004-08
 
 
 (2008-05-23收稿,06-20修回)
本文编辑:刘晓明 蔡辉

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